Protocol for high-fidelity Fixed Actin STED Sample
Protocol for high-fidelity Fixed Actin STED Sample
1, 追求高保真的细胞培养,应用 Sunbloss®细胞高活力培养基 AB 液实现高活力和健康度的细胞培养,并在种成像子细胞前使用 Sunbloss®细胞贴壁辅助液获得充分贴壁延展的细胞;
2, 高保真多细胞器固定,使用Sunbloss®️高保真固定液-微丝37 ℃固定细胞 10min;
3, 使用2ml Sunbloss®️超纯制样PBS简短的清洗细胞 3 次;
4, 使用 Sunbloss®️制样伴侣-贴壁样本辅助染料孵育。保持湿润环境,室温孵育 1 小时,或4 度过夜更佳。染料选择abberior STARRed Phalloidin。
5, 使用2ml Sunbloss®️超纯制样PBS简短的清洗细胞 3 次;
6, 使用 Sunbloss®️超分辨光镜级PFA-16%, 预制成 4%浓度,取 500ul 浸没样品进行后固定,时间10min。
7, 使用2ml Sunbloss®️超纯制样PBS简短的清洗细胞 3 次;
8,不封片,在成像时,选择使用Sunbloss® Antifade成像缓冲液进行高质量STED成像。
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