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Sunbloss®封闭打孔液
二合一复合配方试剂，其核心价值在于同步实现“高效封闭”与“温和打孔”两大功能，为获得高信噪比的超分辨图像奠定基础。它不仅能有效阻断抗体与细胞非特异性位点的结合，显著降低背景荧光；同时可温和渗透细胞膜，确保抗体充分进入胞内与靶抗原结合，提升标记效率。二者协同作用，在整个孵育过程中为样本提供一个稳定、纯净的反应环境，是进行高质量、过饱和抗体标记不可或缺的关键试剂。
| 规格 | 库存 | 价格 | 数量 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| 2ml |
有货 |
-29% |
| 名称 | 库存 | 价格 | 数量 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| Sunbloss®封闭打孔液 |
有货 |
-29% |
| 规格 | 库存 | 价格 | 数量 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| 2ml |
有货 |
-29% |
概述
Blocking & Permeabilization Solution
CAT: HXSP010
Product Specifications and Storage Methods:
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名称
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规格
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数量
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储存
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|---|---|---|---|---|
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1
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Sunbloss® Blocking & Permeabilization Solution I
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0.5ml
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36
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-20度储存
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2
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Sunbloss® Blocking & Permeabilization Solution II
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1.8ml
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1
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室温 25度储存
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1、产品功能
封闭打孔液，是封闭液和打孔液组成的复合成分。
1.1 封闭液：
旨在减少抗体与样本的非特异性结合问题，降低背景荧光，从而突出信号；免疫荧光实验中的“样本”（固定后的细胞或组织切片）表面，除了我们感兴趣的特异性抗原（靶抗原）外，还存在大量“空白”区域。这些区域可能有有电荷（正电荷或负电荷）或具有疏水性，粘附蛋白抗体；也可能含有内源性生物素导致假阳性信号；一些细胞表达 Fc受体、固定剂交联物、细胞碎片等都会吸附抗体。本产品在加入一抗之前以及在一抗二抗孵育的过程中，都用非特异性的、非反应性的蛋白质与特殊分子混合物孵育样本，通过占位和竞争，让非特异性位点被封闭液饱和占据。因此，将特异性的抗原表位留给真正需要结合的一抗和二抗。
1.2 打孔液：
旨在解决抗体进入细胞内部的效率问题，旨在增加标记的丰度。细胞膜和核膜是磷脂双分子层构成的天然屏障，它们只允许小分子或特定物质通过，大分子如抗体（通常是150 kDa左右）无法自由穿透。打孔剂的作用是破坏细胞膜的完整性，在膜上形成微小的孔洞。
两者结合，同时使用，能够为高质量样本提供一个稳定持续的封闭打孔环境，在孵育阶段全程沿用本试剂，能够持续抑制背景生成，提供稳定的通透环境，这在过饱和抗体标记中是极其重要的。
2、产品使用Protocol
2.1 试剂配置
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成分
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成分1
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成分2
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|---|---|---|
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用量
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500μl
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50μl
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操作
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吸取500μl PBS，加入500μl 成分1的管子中 + 50ul成分2混匀并充分融化。
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*请在实验前新鲜配置，不可久置。
2.2 使用 PBS 清洗固定后的样本
准备好固定后的样本，用 Sunbloss®️超纯PBS清洗3次，吸去所有液体。
2.3封闭和打孔
滴加 50ul 封闭打孔工作液，并使用华夏成像制样伴侣孵育膜贴合样品表面，室温孵育 30min；在使用制样伴侣的情况下，一只工作液可以孵育 20 个小皿或者爬片。
*请注意，在没有制样伴侣的情况下，在 20mm 成像小皿内孵育，建议用量是 250ul； 使用细胞爬片，需要完全浸没细胞表面，至少使用 1ml 进行封闭打孔。（建议配备制样伴侣）
2.4 进行后续一抗、二抗的孵育
孵育完成后，一般需要进行抗体或染料的孵育。在孵育时，需沿用本封闭打孔液工作液作为孵育溶液，保持背景抑制和充分通透的试剂环境。
*如果当天无法完成制样，封闭打孔液工作液可以在 4 度储存，建议 3 天之内用完。