Sunbloss®样品基质净化液
解决细胞内背景对荧光信号的干扰。当我们做荧光标记时，细胞质的自发荧光和非特异性结合位点通常产生背景，这会对荧光信号形成强干扰，因此，有目的的去除细胞质成分，对实现高信号背景比的样本至关重要。使用样品净化液，实现可控的、选择性的剔除一部分细胞质，进而实现净化细胞内背景信号的效果。
| 规格 | 库存 | 价格 | 数量 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| KIT |
有货 |
-30% |
| 名称 | 库存 | 价格 | 数量 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| Sunbloss®样品基质净化液 |
有货 |
-30% |
| 规格 | 库存 | 价格 | 数量 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
| KIT |
有货 |
-30% |
概述
Sunbloss®️ CytoClean Solution
CAT:HXSP006
Product Specifications and Storage Methods:
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名称
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规格
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数量
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储存
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1
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Sunbloss®️ CytoClean Solution I
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1ml
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36
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4℃
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2
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Sunbloss®️ CytoClean Solution II
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2ml
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1
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4℃
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1、产品功能
样品基质净化液，旨在解决细胞内背景对荧光信号的干扰。当我们做荧光标记时，细胞质的自发荧光和非特异性结合位点通常产生背景，这会对荧光信号形成强干扰，因此，有目的的去除细胞质成分，对实现高信号背景比的样本至关重要。使用样品净化液，实现可控的、选择性的剔除一部分细胞质，进而实现净化细胞内背景信号的效果。
当只需要关心标记点亮的靶标时候，可以选择性的将细胞质成分成分净化：
1、细胞最深层-细胞核蛋白：可以完全去除细胞质背景，时间 3min-10min；
2、深层次骨架-细胞核骨架和核孔：可以部分去除细胞质背景，时间 2min-5min；
3、细胞质骨架-微管和微管相关蛋白：可以部分去除细胞质背景，去掉游离的单体微管，只保留稳定的丝状微管；时间 5s-30s；
4、细胞质膜和膜类细胞器：不适用，如高尔基体、线粒体、内质网等；（推荐使用Sunbloss®️本底荧光抑制剂、Sunbloss®️荧光净化增强液来净化膜细胞器标记的细胞质背景）
*本试剂盒适用于，具有强贴壁性的细胞以及悬浮细胞，但不适用于弱贴壁的细胞。如，常见贴壁细胞系和部分原代贴壁细胞，如原代星形胶质细胞；悬浮细胞在溶液中进行基质净化是可行的；但是，如果细胞贴壁本身较弱，本试剂盒可能造成细胞从载具上脱落。
*本试剂盒需要在活细胞使用，即，细胞固定之前；
*本试剂盒需要在 37 度的温度下使用，效果最佳；
*具体作用时间需要根据所选择的细胞系，所标记的靶标来优化，可以以当前提供的时间为基准时间来优化。
2、产品使用Protocol
2.1 试剂配置
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成分
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成分1
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成分2
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用量
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1ml
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50μl
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操作
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吸取 50μl 成分 2，加入1ml成分 1 的管子中混匀
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*请在制样前，新鲜配置工作液。
2.2 预热工作液
预热工作液，基质净化在细胞活着的时候进行，因此，接触细胞的所有的试剂，请维持37℃！37℃！37℃！
*建议提前准备好预热的基质净化工作液、预热的PBS、预热的高保真固定液，因为这三个步骤通常是连续操作的
2.3 添加基质净化工作液
吸去细胞培养基，尽可能快的加入工作液，需要完全浸没样本。以玻底面积2.0 直径的皿为例，每个成像玻底皿不少于 350ul。
孵育时间根据实验目的不同而不同：
细胞微管：5s-30s；
细胞核内蛋白：3min-10min；
细胞核骨架和核孔：2min-5min；
膜细胞器：不建议做基质净化；
*根据细胞系的不同，该时间会略有不同，当净化不彻底，可选择延长时间，反之，则选择缩短时间。
2.4 使用 PBS 清洗样本
使用预热好的PBS清洗样本两次。
2.5 进行高保真固定
吸去PBS，加入预热的高保真固定液进行固定，依然维持在 37 度固定，直到细胞被完全固定，详细请参考高保真固定液的使用说明书。
2.6 使用 PBS清洗样本
PBS 清洗三次，进行后续的染色步骤。
3、 产品优势
3.1 样品基质净化液用于细胞核标记
传统细胞核内标记受困于细胞核处于细胞最厚最深的位置，具有很高的物质密度，因而可以产生非特异性结合的位点，以及具有本底荧光的位点也最多。因此细胞核标记不容易实现高信号背景比的样本，信号容易被高背景淹没。
使用样本基质净化液，可以将细胞质背景显著降低。
3.2 样品基质净化液用于标记细胞微管
细胞微管的标记，通常会显示出丝状微管和单体微管的混合。单体微管和中间态的不稳定微管会变成背景，干扰丝状稳定微管的信号。在对样品质量要求极高的成像中(含超分辨率成像），对背景敏感程度高，去掉单体微管，仅保留丝状微管是十分必要的。在这部分，仅列举细胞微管，但样品基质净化操作也适用于其他类似的标记场景中