| | 名称 | 规格 | 数量 | 储存 |
| 1 | Sunbloss® Antifade Imaging Buffer I | 2ml | 19 | 4℃ |
| 2 | Sunbloss® Antifade Imaging Buffer II | 400μl | 1 | -20℃ |
*本产品含有 2 种成分,需要在使用前新鲜配置,不可预混且久置。
1、产品功能
Sunbloss®Antifade成像缓冲液,旨在减轻固定类样本成像中的荧光淬灭问题。本产品可增加荧光稳定性,增强强信号,保护弱信号,使可采样时间增加。可匹配宽场成像、共聚焦成像、部分超分辨率成像等多种场景使用。在超分辨成像中,如高分辨率转盘共聚焦、STED、SIM 等成像,通常会匹配比常规成像更强的激发强度,带来更大的光毒性,因此本产品可用于上述场景中的荧光保护和增强。此外,在 3D 成像中,通常会对一个区域的附近的 Z 区域连续多次激发,对样品的损伤也更强,造成不同深度的信号不均一,本产品也可以用于增强 3D 成像的图像均一性。
*本产品仅适用于固定的样本,有效时间为 1 小时。
*对于活细胞成像,推荐使用Sunbloss®CytoShield活细胞成像缓冲液。
2、产品使用 protocol
2.1 试剂配制
| 成分 | buffer 1 | buffer 2 |
| 用量 | 2000μl | 20μl |
| 操作 | 吸取20μl成分2加入2000μl成分3的管中,混匀,避免打入气泡。 |
2.2 使用 PBS 清洗待成像样品
使用 Sunbloss®️超纯制样 PBS 清洗待成像样品两次;
2.3 进行成像
吸去 PBS,将预混好的缓冲液加入成像玻底皿中,盖上盖子,准备成像。
2.4 样品回收
成像完成后将缓冲液吸走,用PBS快洗3遍、H2O快洗三遍样品。
关键点
预混的缓冲液有效时间为 1 小时;
在缓冲液配置和成像的过程中,应尽可能避免空气交换;
如果样品准备回收,需及时吸去缓冲液,并使用 PBS 及时清洗样品。
3、产品优势
高质量的荧光成像需要荧光稳定且明亮的样本,然而荧光染料在强激光或者长时间曝光累积的光毒性下,经常发生淬灭。Sunbloss®Antifade成像缓冲液可以减轻荧光成像光毒性过程中对靶蛋白、荧光染料的损害。增强初始亮度,同时提高荧光的抗淬灭能力。
Sunbloss®Antifade成像缓冲液对染料抗淬灭性能的提升。
在加入缓冲液前,染料呈现的亮度和稳定性如虚线所示,STAR Red (红色虚线)和STAR Orange (黄色虚线);在加入缓冲液后,染料的初始亮度有 2-3 倍的提升,STAR Red (红色实线)和STAR Orange (黄色实线)。并且从淬灭曲线来看,加入缓冲液后更不易淬灭,染料呈现出更为平缓的淬灭曲线。